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本法系依据聚乙二醇与钡离子和碘离子形成复合物(1:1),用比色法测定聚乙二醇含量。
测定法 取供试品适量,用水稀释,使蛋白质浓度不1%,即为供试品溶液。精密量取供试品溶液1.0ml,加入0.5mol/L高氯酸溶液5.0ml,混匀,室温放置15分钟,以每分钟4000转离心10分钟。取上清液4ml,加入氯化钡溶液(称取氯化钡5g,加水溶解至100ml)1.0ml和0.1mol/L碘溶液(称取碘化钾2.0g,加少量水溶解,然后加碘1.3g,再加水至50ml,摇匀)0.5ml,混匀,室温反应15分钟,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在波长535nm处测定吸光度;同时以1ml水替代供试品溶液,同法操作,即为空白对照。
另精密称取与供试品中聚乙二醇分子量相同的聚乙二醇对照品适量,加水溶解,并制成每1ml含聚乙二醇100μg的溶液,即为聚乙二醇对照品贮备液。
取按下表制备的每1ml含10~50μg的聚乙二醇对照品溶液1.0ml,加入0.5mol/L高氯酸溶液5.0ml,混匀,自本法前述“室温放置15分钟”起,同法操作。
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